Explantátové kultury jsou moderní technologií pro kaktusáře významnou tím, že umožňují (kromě dalších možností) množení a ozdravění rostlin. Problematika je velmi rozsáhlá. V tomto článku se omezím na popis praktických zkušeností a výsledků, kterých bylo dosaženo v amatérských podmínkách naší skromě vybavené laboratoře. Vzhledem k tomu, že pokusy v naší laboratoři stále probíhají, bude tento text postupně doplňován o další poznatky získané praktickým ověřením.
PŘÍPRAVA VZORKU.
Jako vzorek jsem používal semena kaktusů. V literatuře jsou popsány způsoby přípravy vzorků z různých částí rostlin. Dezinfekce těchto vzorků je však komplikovanější. Semena zbavená nečistot byla dezinfikována ethanolem ( byl použit denaturovaný 90 - ti procentní) a po té chlornanem sodným (byl použit přípravek SAVO). Přípravky jsem nechal působit každý cca 10 minut. Bez oplachu byla semena vyseta na živné médium.
DODRŽENÍ STERILNÍCH PODMÍNEK
Dodržení sterilních podmínek při práci s otevřenými nádobami s živným médiem a při manipulacích se vzorky je klíčovou podmínkou úspěchu. Nevlastníme box s laminárním prouděním a tak veškeré manipulace byly prováděny na husté nerezové síti. Pod touto sítí byla umístěna nádoba s vařící se vodou. Unikající pára zabrání všudy-přítomným zárodkům nežádoucích mikroorganismů zkontaminovat výsledek našeho snažení.
POUŽITÉ NÁDOBY
Použity byly sklenice od dětské výživy ( ty modernější s jemnějším závitem). K uzavření nádob byla použita víčka z průhledného a teplovzdorného PE od jedné specializované americké firmy.
PŘÍPRAVA ŽIVNÉHO MÉDIA
Živné médium bylo připraveno dle předpisu uvedeného v příloze tohoto článku. Odvážené množství chemikálií bylo rozpuštěno v odměřeném množství destilované vody a v kádince postupně uvedeno do varu. Horký roztok byl nalit do nádob tak aby při dně tvořil 10 až 15 mm silnou vrstvu. Sklenice s tímto médiem byly sterilizovány zavíčkované v tlakovém hrnci po dobu 20 minut. Po vychladnutí tvoří živné médium rosolovitou hmotu.
VÝSEV SEMEN NA ŽIVNÉ MÉDIUM
Za dodržení přísných podmínek sterility byla semena vyseta na živné médium.
19.01.2001 Ing.Kamil Procházka
Pokračování bude
zveřejněno až bude opět chvíle volného času .
Zpět: